中文

English

鸿运国际的BiFC技术,让蛋白互作一目了然!

发布时间:2025-03-20   信息来源:封卿姬

在生物医学领域,图3展示了农杆菌注射烟草叶片的实验过程,作为基础研究的重要组成部分。实验技术如BiFC(双分子荧光互补)被用于揭示DgnsLTP1和DgPIP在本氏烟草中的相互作用。在此实验中,使用了pCAMBIA1300-YFPn和pCAMBIA1300-YFPc,以及pCAMBIA1300-YFPn-DgnsLTP1和pCAMBIA1300-YFPc作为阴性对照,确保了实验数据的可靠性。 BiFC实验的比例尺为20μm,清晰展示了目标蛋白的互作关系。

鸿运国际的BiFC技术,让蛋白互作一目了然!

然而,在酵母双杂实验中,BD融合诱饵蛋白可能会导致假阳性,因为其单独激活报告基因表达的能力。此外,AD融合靶蛋白的特异性结合也可单独激活表达,进而影响实验结果。因此,在进行BiFC实验之前,建议对目标基因的表达效率进行亚细胞定位评价,以便调整质粒的转化条件。

在制备样品的过程中,必须严格清理叶片表面的杂质,排除空气泡,以确保观察结果的准确。通过显微镜观察时,激发光的电压不宜过高,以保证烟草细胞的轮廓清晰且均匀分布。

双荧光素酶互补实验与BiFC实验原理相似,都是利用荧光蛋白来验证蛋白间的相互作用。值得注意的是,温度对互补效果有显著影响。为此,可采取以下对策:第一,在室温或更低温度下培养细菌或细胞;第二,在生理条件下培养细菌,使融合蛋白得以正常表达后,再进行低温处理或继续在室温下培养以观察效果。

通常采用GFP(绿色荧光蛋白)或RFP(红色荧光蛋白)作为标签,但不同类型的蛋白质可能需要不同的荧光蛋白以实现最佳的检测效果。因此,具体分析每种蛋白是十分重要的。

双荧光素酶实验在生命科学研究中具有重要意义,为解决生物学难题提供了强有力的技术支持。鸿运国际专业提供包括双荧光素酶实验、荧光素酶蛋白互补实验(LCA)与双分子荧光互补(BIFC)等技术服务。无论是方案流程设计还是技术实验执行,从科研技术服务到成品试剂盒的提供,鸿运国际都能满足您的需求。期待与您携手合作,共同推动生物医学研究的发展。